Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Acétyle-Histone H4 (K12) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P62805

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H4

L'Histone H4 est l'une des quatre histones principales qui forment le nucléosome, l'unité fondamentale répétitive de la chromatine. En tant que protéine structurelle hautement conservée, elle joue un rôle essentiel dans l'emballage et l'organisation de l'ADN dans le noyau, influençant directement l'expression des gènes, la réplication de l'ADN, la réparation et la stabilité chromosomique.

Références associées : UniProtKB P62805

La fonction de l'Histone H4 est régulée dynamiquement par un vaste ensemble de modifications post-traductionnelles (PTM), collectivement appelées le « code histone ». L'acétylation à des résidus lysine spécifiques, y compris la lysine 12 (K12, correspondant à K13 dans UniProt P62805), est une marque épigénétique clé qui module la structure de la chromatine et favorise la transcription active. L'acétylation à ce résidu a été documentée dans plusieurs études.

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La localisation subcellulaire de l'Histone H4 est principalement nucléaire, où elle s'associe à l'ADN chromosomique. Des motifs d'acétylation spécifiques, tels qu'en K12, peuvent influencer sa dynamique de localisation lors de processus comme la spermatogenèse.

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Structurellement, la protéine Histone H4 pèse environ 11,4 kDa et est codée par plusieurs copies de gènes (par exemple, H4C1, H4C2, etc.) qui produisent une séquence protéique identique. Cette multiplicité assure des niveaux d'expression élevés nécessaires à l'assemblage de la chromatine. En raison de la conservation évolutive extrême de la séquence de l'Histone H4 entre les espèces, les anticorps ciblant cette protéine présentent souvent une large réactivité croisée.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Conception de l'Immunogène : Cet anticorps a été élevé contre un peptide acétylé synthétique autour de K12. Pour une détection spécifique, considérez que l'anticorps peut reconnaître préférentiellement la forme acétylée ; la validation avec des échantillons traités par des inhibiteurs de désacétylases peut améliorer le signal.
• Western Blotting (WB) : L'Histone H4 a un faible poids moléculaire (~11 kDa). Utilisez des gels SDS-PAGE à 15 % ou en gradient et assurez un transfert efficace (par exemple, transfert humide pendant la nuit à basse tension) pour éviter la perte des petites protéines. Incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et confirmez la spécificité à l'aide de tests de compétition avec des peptides non acétylés si nécessaire.
• Immunohistochimie (IHC-P) & Immunofluorescence (IF/ICC) : La récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) peut améliorer l'accessibilité de l'épitope. Utilisez des tissus de contrôle positif avec une transcription ou une prolifération active (par exemple, testicule, thymus) et envisagez de bloquer la biotine ou les peroxydases endogènes conformément aux protocoles standard.
• ELISA : Pour l'analyse quantitative, recouvrez les plaques avec le peptide H4 acétylé ou des extraits d'histones et vérifiez la spécificité du peptide en utilisant des témoins non acétylés.
• Réactivité Croisée : L'anticorps est prédit pour réagir de manière croisée avec l'Histone H4 acétylée d'humain, de souris, de rat et de nombreuses autres espèces. Validez dans votre système expérimental pour exclure la liaison à l'H4 non acétylée ou à d'autres protéines acétylées, compte tenu notamment de la nature polyclonale de l'anticorps.
• Approches Alternatives : Si une haute spécificité pour la marque acétyl-K12 seule est requise, envisagez de coupler avec un anticorps monoclonal ou d'utiliser des tests de compétition spécifiques au site pour confirmer la reconnaissance de l'épitope.

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