Acétyl-Histone H4-K12 Anticorps monoclonal de lapin (P62805) pour ChIP, WB et IHC-P | CamelBio

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H4

L'histone H4 est l'une des quatre protéines histones centrales qui forment le nucléosome, l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. Avec les histones H2A, H2B et H3, elle enveloppe et compacte l'ADN, régulant ainsi l'accès au matériel génétique. Cette compaction est essentielle pour une ségrégation correcte des chromosomes lors de la division cellulaire et pour l'organisation spatiale du génome dans le noyau. L'histone H4 joue un rôle central dans les processus utilisant l'ADN comme matrice, tels que la transcription, la réplication et la réparation, en contrôlant l'accessibilité de l'ADN via un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles, collectivement appelées le code histone.
Références associées : UniProt P62805

L'extrémité N-terminale de l'histone H4 est sujette à de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et d'autres. L'acétylation sur la lysine 12 (H4K12ac ; correspondant au résidu 13 de la protéine mature) est une marque histone bien caractérisée associée à la chromatine transcriptionnellement active et est reconnue par diverses protéines contenant un bromodomaine. Cette modification est régulée de manière dynamique par les histone acétyltransférases (HAT) et les déacétylases (HDAC), et sa présence à des loci génomiques spécifiques est corrélée à l'activation des gènes et aux états de chromatine ouverte.
Références associées : PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735

L'histone H4 est principalement localisée dans le noyau et est étroitement associée à l'ADN chromosomique. Dans certains contextes, comme lors de la spermatogenèse, l'histone H4 acétylée s'enrichit dans le noyau des spermatides en élongation, suggérant un rôle dans le remodelage de la chromatine lors du développement des cellules germinales. La protéine est exprimée de manière ubiquitaire dans tous les tissus, reflétant son rôle fondamental dans la structure de la chromatine.
Références associées : UniProt P62805

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour les expériences d'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), envisagez d'optimiser le temps de réticulation et les conditions de sonication pour fragmenter la chromatine en fragments de 200 à 500 pb, car les interactions histone-ADN sont robustes.
• Lors de la réalisation de western blot, l'enrichissement des histones par extraction acide ou des kits de purification d'histones peut améliorer le signal. Gardez les échantillons sur glace et ajoutez des inhibiteurs appropriés des histone déacétylases si les niveaux d'acétylation doivent être préservés.
• Cet anticorps est prédit avoir une large réactivité croisée entre les espèces en raison de la séquence hautement conservée de l'histone H4. Validez l'anticorps dans l'espèce et le système tissulaire d'intérêt, car les profils d'acétylation peuvent varier.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique avec un tampon citrate et une optimisation minutieuse de la concentration d'anticorps sont recommandées pour obtenir une coloration nucléaire spécifique.
• Le format monoclonal de lapin offre une performance constante d'un lot à l'autre et une haute spécificité, le rendant adapté aux comparaisons multi-échantillons et aux dosages quantitatifs.

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