Anticorps monoclonal de lapin Acétyl-Histone H3-K4 (Q16695/P68431) pour WB, IP, IHC, ChIP, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

L'Histone H3 est un composant essentiel du nucléosome, l'unité de répétition fondamentale de la chromatine. Avec les histones H2A, H2B et H4, elle forme un octamère autour duquel environ 147 paires de bases d'ADN s'enroulent, facilitant la compaction et l'organisation de l'ADN dans le noyau. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

Les nucléosomes régulent l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires, jouant ainsi un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Cette fonction régulatrice est médiée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) sur les histones, collectivement appelé « code histone ». Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

L'acétylation est l'une des MPT les plus étudiées et est généralement associée à un état de chromatine ouvert et transcriptionnellement actif. L'acétylation de résidus lysine spécifiques, dont la lysine 4 (H3K4ac), joue un rôle critique dans la régulation épigénétique et l'expression génique. Références associées : UniProt P68431 (annotations d'acétylation)

Il existe plusieurs formes variantes de l'Histone H3 chez les mammifères. l'Histone H3.1 canonique (codée par plusieurs gènes comme ceux sous l'accession P68431) est exprimée tout au long du cycle cellulaire, tandis que la variante H3.1t (accession Q16695) est exprimée dans les cellules testiculaires. L'épitope de cet anticorps se situe dans une région de la queue N-terminale très conservée, ce qui permet une large réactivité croisée entre espèces. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

L'Histone H3 est localisée dans le noyau et est étroitement associée à l'ADN chromosomique. Sa présence dans les régions activement transcrites et au niveau des éléments régulateurs souligne l'importance d'étudier les modifications site-spécifiques comme l'acétylation H3K4. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique acétylé entourant la lysine 4 de l'Histone H3 humaine, conçu pour reconnaître spécifiquement la forme acétylée de H3K4.
• Les applications recommandées incluent le Western blot (détectant une bande à ~15 kDa), l'immunoprécipitation, l'immunofluorescence/ICC, l'immunohistochimie (paraffine), le dot blot, l'immunoprécipitation de la chromatine et l'ELISA.
• Pour le ChIP, pensez à optimiser les conditions de réticulation et de sonication ; la spécificité de l'anticorps pour l'épitope acétylé le rend adapté à la capture des régions de chromatine activement transcrites.
• Lors de l'utilisation pour IP ou IF, validez l'anticorps dans votre système d'échantillon spécifique et incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, traitement avec des inhibiteurs d'histone désacétylase pour augmenter les niveaux d'acétylation).
• En raison de la forte conservation entre espèces, une réactivité croisée est attendue avec l'homme, la souris, le rat et d'autres espèces (large spectre prévu) ; vérifiez-la dans les espèces non typiques si nécessaire.
• Pour les applications critiques, une pré-adsorption avec un peptide non acétylé peut être envisagée pour confirmer la spécificité.

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