Anticorps polyclonal de lapin Acétyl-Histone H3-K27 (Q16695/P68431) pour WB, DB, ELISA, ChIP – CamelBio

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

L'histone H3 est un composant essentiel du nucléosome, l'unité de répétition fondamentale de la chromatine. Les nucléosomes enroulent et compactent l'ADN, contrôlant ainsi l'accessibilité de l'ADN pour la transcription, la réplication et la réparation. Les histones jouent un rôle central dans le maintien de la stabilité chromosomique et la régulation de l'expression génique grâce à un ensemble dynamique de modifications post-traductionnelles (MPT) connu sous le nom de « code histone ». Ces modifications, incluant l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, organisent la structure de la chromatine et recrutent les protéines effectrices.

Les variants de H3, tels que la forme canonique H3.1 (codée par plusieurs gènes dont H3C1–H3C12) et la forme H3.1t spécifique du testicule (H3-4), partagent des séquences très conservées. L'acétylation sur la lysine 27 (H3K27ac) est une marque épigénétique clé principalement associée aux enhanceurs et promoteurs actifs, facilitant une conformation de chromatine ouverte favorable à la transcription.

L'histone H3 est majoritairement localisée dans le noyau et se trouve le long des chromosomes. Alors que H3.1 est exprimée dans la plupart des cellules en division, H3.1t est enrichie dans les cellules testiculaires, ce qui reflète son rôle dans le remodelage de la chromatine au cours de la spermatogenèse.

Références associées : PMID:17194708

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats de cellules entières ou des extraits enrichis en histones. Confirmez la spécificité en préincubant l'anticorps avec des peptides de blocage acétylés comparativement à non acétylés.
• Dans les applications dot blot (DB) et ELISA, titrez l'anticorps et incluez à la fois des contrôles de peptides acétylés et non acétylés pour évaluer la spécificité de liaison.
• Pour le ChIP, optimisez les conditions de réticulation et de sonication pour votre type cellulaire. Validez l'enrichissement par qPCR sur des loci connus positifs pour H3K27ac (par ex. promoteurs de gènes actifs) et des régions de contrôle négatives. Incluez toujours un contrôle simulé avec IgG.
• Conseil général : puisque les modifications d'histones sont dynamiques et peuvent changer au cours du cycle cellulaire ou en réponse à des stimuli, manipulez et traitez toujours vos échantillons de manière cohérente pour préserver les MPT et éviter les artefacts.

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