Anticorps monoclonal de lapin Acétyl-Histone H3-K27 pour ChIP, WB et IHC (SWISS : Q16695 / P68431)

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3 (acétylation K27)

• L'Histone H3 est un composant central du nucléosome, qui enroule et compacte l'ADN en chromatine, limitant ainsi l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires qui l'utilisent comme matrice. Les histones jouent un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée dynamiquement par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT), collectivement appelées code histone, et par le remodelage des nucléosomes. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• L'Histone H3 est principalement localisé dans le noyau et constitue un composant structurel clé des chromosomes. Il se trouve à la fois dans l'euchromatine et l'hétérochromatine, où ses modèles de MPT distinguent ces deux états. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• Deux isoformes majeures sont représentées par les accès SWISS Q16695 (histone H3.1t spécifique du testicule) et P68431 (histone H3.1 dépendante de la réplication), qui est largement exprimée. Le variant spécifique du testicule est exprimé exclusivement dans les cellules testiculaires. Références associées : UniProt Q16695
• L'Histone H3 subit un large éventail de modifications post-traductionnelles, incluant l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, l'ubiquitination et l'ADP-ribosylation. L'acétylation de résidus lysine spécifiques est une marque épigénétique critique associée à l'activation transcriptionnelle. Par exemple, l'acétylation sur la lysine 19 (K19ac) a été identifiée par de multiples études (PMID:19608861). Bien que la base de connaissances UniProt n'annote pas actuellement l'acétylation sur K27, cette modification est une marque bien caractérisée dans la littérature. La marque acétyl-lysine est régulée dynamiquement par les histone acétyltransférases (HAT) et les désacétylases (HDAC), influençant la structure de la chromatine et l'expression génique. Références associées : PMID:19608861, UniProt Q16695

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide acétylé synthétique autour de K27, ce qui indique la spécificité de l'anticorps pour l'état acétylé. Vérifiez la spécificité à l'aide d'une compétition par peptide non acétylé ou de contrôles de désacétylation enzymatique.
• Cet anticorps a été validé pour un large éventail d'applications : Western Blot (WB), Dot Blot (DB), Immunohistochimie sur paraffine (IHC-P), Immunofluorescence/Immunocytochimie (IF/ICC), ELISA, Immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) et ChIP-seq. Pour les applications ChIP, envisagez d'optimiser la réticulation et la concentration d'anticorps pour votre contexte de chromatine spécifique.
• Le poids moléculaire prédit est de 15 kDa. Utilisez des gels SDS-PAGE à haut pourcentage (par exemple 15 %) ou des gels à gradient pour une résolution optimale des protéines de faible poids moléculaire.
• La réactivité croisée est prédite pour l'Humain, la Souris, le Rat et d'autres espèces (large spectre prédit) sur la base de la conservation de la séquence de l'Histone H3. Validez-la dans votre espèce cible si elle n'est pas spécifiquement listée.
• Les protocoles d'extraction d'histones (extraction acide ou haute salinité) peuvent améliorer le signal en WB en enrichissant les protéines nucléaires.
• Pour les applications quantitatives, envisagez d'utiliser l'Histone H3 recombinant avec et sans acétylation K27 comme étalons.

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