Acétyl-Histone H3-K23 Anticorps Polyclonal de Lapin (Q16695/P68431) pour WB, ChIP, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3

L'histone H3 est un composant central des nucléosomes, les unités répétitives fondamentales de la chromatine. Les nucléosomes enroulent et compactent l'ADN, limitant l'accès aux machineries cellulaires qui nécessitent l'ADN comme matrice. Grâce à ce rôle structurel, les histones sont centrales dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité est modulée dynamiquement par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) collectivement connues sous le nom de code histone, ainsi que par le remodelage des nucléosomes.

L'acétylation au niveau de la lysine 23 (K23) de l'extrémité N-terminale de l'histone H3 est une MPT significative qui contribue à la décondensation de la chromatine et à l'activation génique. Ce site correspond à K24 dans certaines numérotations de séquence en raison du clivage de la méthionine initiateur. Plusieurs études ont identifié l'acétylation de K23 dans divers contextes cellulaires, la reliant à des états de chromatine ouverte et à la régulation transcriptionnelle.

Références associées : PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16457588

La protéine Histone H3.1 (codée par des gènes tels que H3C1, H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12 et HIST1H3A) est typiquement localisée dans le noyau et sur les chromosomes. L'isoforme spécifique du testicule H3.1t (Q16695) est exprimée dans les cellules testiculaires, tandis que la H3.1 canonique (P68431) est ubiquitaire. Les deux variants partagent le site d'acétylation K23 conservé.

L'histone H3 est soumise à de nombreuses autres MPT, notamment la méthylation, la phosphorylation, la citrullination et d'autres acylations, qui régulent de manière complexe la fonction de la chromatine. La spécificité de l'anticorps pour la forme acétylée de K23 permet une dissection précise de ces mécanismes de régulation.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Cet anticorps est généré contre un peptide synthétique acétylé correspondant aux résidus entourant K23 de l'Histone H3 humaine. Une réactivité croisée est prédite sur une large gamme d'espèces en raison de la conservation de séquence de cette région ; confirmez toujours avec vos propres échantillons.
• Pour le Western blot (WB), une bande autour de 15 kDa est attendue. Envisagez de charger des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des cellules traitées avec des inhibiteurs d'histone désacétylase vs non traitées) pour vérifier le signal dépendant de l'acétylation.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), une optimisation de la récupération antigénique et du blocage peut être nécessaire ; validez la spécificité en utilisant une compétition par peptide ou des lignées cellulaires knock-out si disponibles.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), assurez une réticulation et un cisaillement appropriés. Incluez un contrôle IgG non spécifique et testez différentes concentrations d'anticorps. Cet anticorps est adapté au ChIP comme indiqué par le fournisseur.
• Les applications ELISA et autres doivent être validées dans le système d'échantillons pertinent. La sensibilité et la spécificité peuvent varier entre les tests.
• Comme pour tout anticorps spécifique d'une modification de site, la cohérence entre les lots peut affecter les résultats ; titrez toujours et confirmez la dilution de travail optimale.

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