Acétyl-Histone H3 (K23) Anticorps monoclonal de lapin (Q16695 / P68431) pour WB, IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

Architecture de la chromatine et stabilité du génome : L'histone H3 est un composant central du nucléosome, essentiel pour l'empaquetage de l'ADN dans la chromatine. Elle joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et le maintien de la stabilité chromosomique. Le remodelage dynamique des nucléosomes régit l'accessibilité de l'ADN à la machinerie transcriptionnelle et à d'autres facteurs. Références associées : UniProt Q16695/P68431

Localisation nucléaire et chromosomique : L'histone H3 réside principalement dans le noyau et s'associe étroitement aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire, ce qui soutient ses fonctions structurelles et régulatrices. Références associées : UniProt Q16695/P68431

Diversité des isoformes : Le génome humain code pour plusieurs variants de l'histone H3. Les identifiants SWISS Q16695 (H3.1t) et P68431 (H3.1 canonique) mettent en évidence respectivement des isoformes spécifiques à certains tissus et exprimées de manière ubiquitaire. H3.1t est spécifiquement exprimé dans les cellules testiculaires, tandis que H3.1 est largement présent. Références associées : UniProt Q16695/P68431

Modifications post-traductionnelles (MPT) : L'histone H3 est soumise à une vaste gamme de MPT, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et la citrullination, qui forment collectivement le « code histone ». L'acétylation au niveau de la lysine 23 (H3K23ac) est une modification spécifique qui module la structure de la chromatine et l'expression génique, à l'instar d'autres sites d'acétylation bien caractérisés comme K19 et K24. Références associées : PMID:19608861

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Vérification de la spécificité : L'immunogène étant un peptide acétylé autour de K23, on s'attend à ce que l'anticorps reconnaisse l'histone H3 acétylée au niveau de K23 (H3K23ac). Incluez des contrôles appropriés, tels que le blocage par un peptide non acétylé ou le traitement par des inhibiteurs de déacétylases, pour confirmer la spécificité.
• Préparation de l'échantillon : Pour le Western blot, les lysats enrichis en histones (par exemple, histones extraits par acidification) donnent souvent des signaux optimaux. Envisagez de tester différentes méthodes d'extraction pour évaluer l'efficacité de la détection dans votre système modèle spécifique.
• Réactivité croisée : Le fournisseur indique une large réactivité croisée prédite (Humain, Souris, Rat, Autre), mais une validation indépendante dans votre espèce cible et votre type d'échantillon est recommandée.
• Mise en place de l'ELISA : Lors du développement de tests ELISA, utilisez le peptide H3K23 acétylé comme étalon ou contrôle positif. Associez-le à un anticorps de capture anti-histone H3 pan pour les formats ELISA sandwich si vous le souhaitez.
• Immunofluorescence (IF/ICC) : Optimisez les étapes de fixation et de perméabilisation pour conserver l'accessibilité de l'épitope. Une co-coloration avec un anticorps anti-histone H3 total peut aider à confirmer la localisation et la spécificité de la coloration.
• Remarque générale : Tous les protocoles suggérés sont des points de départ ; l'optimisation empirique est essentielle pour obtenir les meilleures performances dans votre contexte expérimental.

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