Anticorps monoclonal de lapin Acétyl-Histone H3-K14 (Q16695 / P68431) pour WB, DB, ChIP, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

• L'Histone H3 est un composant essentiel du nucléosome, qui enroule et compacte l'ADN dans la chromatine, régulant ainsi l'accessibilité de l'ADN pour la transcription, la réplication, la réparation et maintenant la stabilité chromosomique. Ce rôle est essentiel pour tous les processus basés sur l'ADN. Références associées : PMID:16185088, PMID:16267050
• Les isoformes H3 de l'Histone H3.1 (codées par plusieurs copies de gènes, par exemple HIST1H3A-J) et H3.1t (spécifique du testicule, codée par HIST3H3) partagent le même domaine de repliement d'histone et sont principalement localisées dans le noyau et les chromosomes. H3.1t est exprimé spécifiquement dans les cellules testiculaires, tandis que l'Histone H3.1 canonique est exprimé de manière ubiquitaire.
• Les modifications post-traductionnelles des histones, en particulier l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et autres, constituent le « code histone » qui régit la dynamique de la chromatine. L'acétylation de la lysine 14 de l'histone H3 (H3K14ac) est une caractéristique de la chromatine active et est reconnue par les protéines contenant un bromodomaine. Références associées : PMID:16267050, PMID:16627869
• Cet anticorps cible spécifiquement la forme acétylée de K14, permettant l'étude de la régulation transcriptionnelle médiée par H3K14ac et des marques épigénétiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide acétylé synthétique autour du K14 de l'Histone H3 humaine. Lors de la conception d'anticorps similaires, il est recommandé d'utiliser un peptide acétylé pour garantir la spécificité envers la forme acétylée.
• Pour le Western blot (WB), validez l'anticorps en utilisant des lysats cellulaires totaux de cellules humaines, de souris ou de rat. Un traitement avec des inhibiteurs des histone désacétylases (par exemple TSA ou butyrate de sodium) peut améliorer le signal et confirmer la détection dépendante de l'acétylation.
• En immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), les protocoles standard de réticulation et de cisaillement sont adaptés. Il est recommandé d'inclure des contrôles appropriés (par exemple compétition par peptide non acétylé, IgG de lapin normal) pour garantir la spécificité de grade ChIP.
• Pour les applications ELISA et transfert de dots (DB), utilisez des peptides H3K14 acétylés et non acétylés comme contrôles positifs et négatifs pour vérifier la liaison.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été observée ; cependant, les utilisateurs doivent valider l'anticorps dans leur système expérimental spécifique, car les niveaux d'expression et de modification de la cible peuvent varier.

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