Anticorps polyclonal de lapin Acétyl-Histone H2B-K20 (P62807/Q16778) pour WB, ELISA, ChIP

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H2B

L'Histone H2B est un composant central du nucléosome, l'unité de répétition fondamentale de la chromatine. Avec les histones H2A, H3 et H4, elle enroule et compacte l'ADN, régulant ainsi l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires. L'Histone H2B joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT), collectivement appelées code histone, qui incluent l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et d'autres modifications. Les deux variants principaux d'Histone H2B humaine (SWISS P62807 et Q16778) partagent des séquences quasi identiques et sont codés par des clusters de gènes différents. Références associées : UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778.

En plus de ses fonctions nucléaires, l'Histone H2B présente une large activité antibactérienne et pourrait contribuer à la barrière antimicrobienne de l'épithélium colique et à l'activité bactéricide du liquide amniotique.

L'Histone H2B se localise principalement dans le noyau et est étroitement associée aux chromosomes. Elle est largement exprimée dans tous les tissus, ce qui reflète son rôle fondamental dans l'organisation du génome. Références associées : UniProtKB P62807, UniProtKB Q16778.

L'acétylation sur la lysine 20 (K20) est une MPT spécifique qui peut influencer la structure de la chromatine et l'expression génique. Des études de spectrométrie de masse ont identifié de nombreux sites d'acétylation sur H2B, dont le K20 (référencé comme K21 dans certains alignements). Cet anticorps reconnaît spécifiquement la forme acétylée du K20, permettant un suivi précis de cette modification en biologie de la chromatine et en recherche épigénétique. Références associées : PMID:16283522, PMID:16627869.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps polyclonal a été généré contre un peptide acétylé synthétique correspondant à la lysine 20 de l'Histone H2B humaine. Il est prévu qu'il reconnaisse spécifiquement le H2B-K20 acétylé dans les tests adaptés.
• Pour le Western blot (WB), il est recommandé d'utiliser des extraits nucléaires ou des lysats cellulaires totaux d'échantillons humains, de souris ou de rat. Le poids moléculaire prédit est d'environ 14 kDa. La dilution de départ recommandée doit être déterminée et validée empiriquement dans votre système d'échantillon adapté.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Associez-le à un anticorps anti-H2B total approprié pour la normalisation. Validez la spécificité en utilisant des compétiteurs peptidiques acétylés et non acétylés.
• Pour l'immuno-précipitation de la chromatine (ChIP), optimisez les conditions de réticulation et de cisaillement de la chromatine pour votre type cellulaire. Incluez un anticorps anti-Histone H3 ou anti-H2B total comme contrôle positif, et un contrôle d'isotype IgG pour évaluer la liaison non spécifique.
• Des applications supplémentaires sont possibles ; utilisez toujours des contrôles appropriés et validez les performances dans votre contexte expérimental.

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