Anticorps polyclonal de lapin anti-acétyl-histone H2A (K5) (P04908/P0C0S8) pour WB, IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H2A

• L'histone H2A est un composant essentiel du nucléosome, enroulant et compactant l'ADN en chromatine. Cela limite l'accessibilité de l'ADN et joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique.
• La localisation subcellulaire de l'H2A est principalement le noyau et le chromosome.
• L'histone H2A fait l'objet de modifications post-traductionnelles (PTM) étendues sur sa queue N-terminale, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et l'ubiquitination. Ces modifications constituent le « code histone » et régulent la dynamique de la chromatine.
• L'acétylation au niveau de la lysine 5 (H2AK5ac) est une marque épigénétique clé associée à la transcription active et à la chromatine ouverte. Cet anticorps est produit contre un peptide acétylé synthétique autour de la K5 et reconnaît spécifiquement la forme acétylée.
• De multiples gènes codent pour des variants de l'H2A (par exemple, H2AC4, H2AC8, H2AC11, H2AC15, H2AC16, H2AC17), qui sont hautement conservés entre les espèces. La séquence de l'immunogène est dérivée de l'H2A humaine et devrait présenter une réactivité croisée avec les orthologues en raison de la forte homologie de séquence.

Références associées : UniProt P04908 et UniProt P0C0S8 annotent de manière exhaustive les fonctions et les modifications de l'histone H2A.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide acétylé synthétique autour de la K5. Pour confirmer la spécificité pour la forme acétylée, envisagez d'utiliser un blocage par peptide non acétylé ou de comparer les signaux provenant de cellules traitées avec des inhibiteurs d'histone désacétylase (par exemple, trichostatine A, butyrate de sodium) par rapport à des témoins non traités.
• En Western Blot (WB), une bande à environ 14 kDa est attendue pour l'histone H2A. L'intensité du signal dépendra du statut d'acétylation de l'échantillon.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation. La fixation au méthanol ou la perméabilisation au Triton X-100 sont généralement efficaces pour les cibles nucléaires d'histones.
• Cet anticorps a été validé pour l'ELISA et peut être adapté aux dosages quantitatifs lorsqu'il est associé à des étalons appropriés.
• La réactivité croisée rapportée inclut l'humain, la souris et le rat, avec une large gamme d'autres espèces prédites sur la base de l'homologie de séquence. Validez la réactivité dans votre système modèle spécifique si elle n'a pas été testée auparavant.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variation d'un lot à l'autre peut se produire. Le titrage et l'optimisation pour chaque application et type d'échantillon sont recommandés.

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