Acétyl-DNMT1 (K1127/K1129/K1131/K1133) Anticorps Polyclonal de Lapin (P26358) pour IHC-P, IF/ICC, ELISA

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la DNA (cytosine-5)-méthyltransferase 1

La DNMT1 est une ADN méthyltransférase cruciale responsable du maintien des motifs de méthylation CpG pendant la réplication de l'ADN, assurant ainsi l'héritage épigénétique. Elle méthyle préférentiellement l'ADN hémiméthylé et s'associe aux foyers de réplication en phase S, mais agit également indépendamment de la réplication pendant les phases G2 et M pour préserver les paysages de méthylation globaux. Le silençage médié par la DNMT1 implique une interaction directe avec HDAC2 et la formation de complexes corépresseurs qui modulent les modifications des histones et l'expression génique. Références associées : PMID:17200670, PMID:18754681, PMID:21745816, PMID:26070743, PMID:10888872, PMID:24623306

L'enzyme se localise principalement dans le noyau et est recrutée vers la chromatine au niveau des foyers de réplication via son domaine RFTS, qui reconnaît l'histone H3 ubiquitinylée. Elle se localise également dans les régions périnucléolaires, reflétant des fonctions spécialisées dans le maintien de l'hétérochromatine. Références associées : PMID:12145218, PMID:24492612, PMID:29053958

La DNMT1 est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux particulièrement élevés dans les tissus fœtaux, le cœur, le rein, le placenta et les cellules mononucléées du sang périphérique, et une expression plus faible dans la rate, les poumons, le cerveau, l'intestin grêle, le côlon, le foie et le muscle squelettique. Références associées : PMID:10325416

Les modifications post-traductionnelles de la DNMT1, en particulier l'acétylation, jouent des rôles régulateurs clés. Le cluster de lysines ciblé par cet anticorps (K1127/K1129/K1131/K1133 dans l'isoforme 1) correspond à des sites d'acétylation connus (K1111/K1113/K1115/K1117/K1119/K1121 dans la séquence canonique) qui sont modifiés par des histone acétyltransférases et peuvent influencer la stabilité, la localisation et l'interaction de la protéine avec d'autres facteurs épigénétiques. Références associées : PMID:21947282, PMID:19608861

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Cet anticorps polyclonal de lapin a été produit contre un peptide synthétique acétylé englobant K1127, K1129, K1131 et K1133 de la DNMT1 humaine. Il est censé reconnaître spécifiquement la forme acétylée de la protéine.
• Pour l'IHC-P, des méthodes standard de démasquage antigénique (par exemple, démasquage thermique en tampon citrate, pH 6.0) peuvent être nécessaires pour exposer l'épitope. La dilution optimale de l'anticorps et les conditions d'incubation doivent être déterminées empiriquement.
• Lors de la réalisation d'IF/ICC, la fixation au paraformaldéhyde 4 % suivie d'une perméabilisation au Triton X-100 0,1 % est couramment utilisée ; cependant, ces étapes doivent être validées dans le système cellulaire ou tissulaire spécifique.
• L'ELISA peut être utilisé pour détecter et quantifier les niveaux de DNMT1 acétylée dans des lysats cellulaires ou des extraits tissulaires. Envisagez d'utiliser un test de compétition par peptide pour confirmer la spécificité de la liaison.
• Comme la DNMT1 est largement exprimée, incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, tissus ou lignées cellulaires avec un statut d'acétylation connu) pour vérifier les profils de marquage.
• Le poids moléculaire prédit est de 183 kDa ; si vous réutilisez l'anticorps pour des applications non validées (par exemple, Western blot), validez la taille de la bande et la spécificité en conséquence.

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